DiD染料是一种亲脂性荧光染料,主要用于细胞膜和其他脂溶性生物结构的染色,具有高荧光信号、不易淬灭、自身荧光干扰小等优势,可以用于细胞和组织染色、多色成像、活体成像以及细胞示踪等实验。细胞染色实验中,建议使用无菌PBS缓冲液(KSG4250-500ML),超低内毒素,有效防止微生物污染,避免细胞因污染而死亡或代谢异常,从而确保细胞在染色过程中保持良好的生理状态。
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
DiD细胞膜远红外荧光染色试剂盒 |
KSG1742-100T |
100T |
产品描述
DiD染料是亲脂性荧光染料家族成员之一,它可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当DiD与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,它们具有高消光系数,极性依赖性荧光和短激发态寿命。一旦对细胞染色,染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。DiD(远红色荧光)可以用来对活细胞进行成像和流式分析。DiD最大激发波长为644 nm,最大发射波长为663 nm,有着比DiI(一种常见的细胞荧光染料)更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。此外DiD探针一般不影响细胞的生存能力,故可正向或逆向的标记细胞或某些物质(外泌体)用作示踪检测。
本产品DiD细胞膜远红外荧光染色试剂盒,包含DiD荧光探针及优化的染色缓冲液,使细胞膜染色更加快速、荧光更加明亮稳定、效果更好。DiD染色前后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂)的固定,推荐使用0.5% Saponin通透,但会影响DiD在细胞膜的定位并会增加细胞内的染色。
储存与运输
干冰运输;-20℃避光保存,有效期6个月。
试剂盒组成
Component Number |
Component |
KSG1742-100T |
KSG1742-1 |
DiD探针(500×) |
200 μL |
KSG1742-2 |
染色缓冲液 |
100 mL |
说明书 |
1份 | |
操作步骤
1. DiD染色工作液配制:
1.1. 将DiD探针与染色缓冲液以1:500比例混合稀释,配制成DiD染色工作液(注意,现配现用,最优探针稀释浓度为1×,可在0.8×~1.2×适度调整,以获得最佳染色效果。
2. 悬浮细胞染色:
2.1. 收集悬浮细胞,以500-1000 g室温离心3-5 min,去除细胞上清。
2.2. 使用DiD染色工作液重悬细胞,使细胞密度在1-2×106个/mL。
2.3. 置于37℃避光孵育5-20 min(建议根据具体细胞调整染色时间,以获得最佳染色效果,首次孵育建议选择20 min)。
2.4. 孵育结束后,500-1000 g室温离心3-5 min,吸除DiD染色工作液。
2.5. 用37℃预热的PBS或细胞培养基重悬细胞,500-1000 g离心3-5 min,去除上清。
2.6. 重复2.5步骤一次。
2.7. 流式细胞仪上机检测,或将细胞转移至多孔板、细胞培养皿或者载玻片上,在荧光显微镜下观察。DiD最大激发波长644 nm,最大发射波长663 nm。
3. 贴壁细胞染色(6孔板为例):
3.1. 将细胞提前以一定密度种植于6孔板中。
3.2. 吸除细胞培养基,用PBS(KSG4202)洗涤细胞2次。加入1 mL DiD染色工作液(其他规格孔板,视情况调整,保证染料覆盖细胞)。
3.3. 置于37℃避光孵育5-20 min,吸除DiD染色工作液。建议根据具体细胞调整染色时间,以获得最佳染色效果,首次孵育建议选择20 min。
3.4. 用37℃预热的PBS或细胞培养基,洗涤细胞1-2次。
3.5. 加入37℃预热的PBS或细胞培养基,荧光显微镜下观察。DiD最大激发波长644 nm,最大发射波长663 nm。
注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题,请注意避光以减缓荧光猝灭。
2. 探针亲脂性的特点,实验过程中请避免使用含有甘油或其它有机物的试剂,否则会影响染色效果。
3. 当需要固定操作时,样品宜在4%多聚甲醛中进行固定,其他不适当的固定液会导致荧光背景高。
4. 由于细胞间敏感性和实验目的的不同,探针的稀释比和孵育时间需根据实际情况适当调整。
5. DiD探针(500×)应分装后保存,避免反复冻融。
6. 为了您的健康和安全,操作时请穿好实验服、戴好手套。
本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
货号 |
名称 |
目标物 |
EX/EM |
活细胞染色 |
染色后固定 |
染色后破膜 |
染色前固定 |
染色前破膜 |
荧光酶标仪 |
荧光显微镜 |
流式细胞仪 |
Hoechst 33342染色液(1 mg/mL) |
细胞核 |
350/461 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
√ |
||
Hoechst 33258染液(即用型) |
细胞核 |
350/461 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
||
DAPI染色试剂(即用型) |
细胞核 |
350/461 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
||
细胞核 |
350/461 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
|||
PI染液 |
细胞核 |
535/615 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
√ |
|
iF488-鬼笔环肽 |
细胞骨架 |
493/517 nm |
否 |
否 |
否 |
必需固定 |
是 |
√ |
|||
iF555-鬼笔环肽 |
细胞骨架 |
556/574 nm |
否 |
否 |
否 |
必需固定 |
是 |
√ |
|||
JC-1线粒体膜电位检测试剂盒 |
线粒体 |
585/590;514.529 |
是 |
否 |
否 |
不能固定 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 |
线粒体 |
490/525 nm and 540/590 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
DiO细胞膜绿色荧光染色试剂盒 |
细胞膜 |
484/501 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
|||
DiI细胞膜红色荧光染色试剂盒 |
细胞膜 |
549/565 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
|||
DiD细胞膜荧光染色试剂盒(洋红色) |
细胞膜 |
644/665 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
|||
ER-Tracker Green(内质网绿色荧光探针) |
内质网 |
504/511 nm |
是 |
是 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
ER-Tracker Red(内质网红色荧光探针) |
内质网 |
587/615 nm |
是 |
是 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
Lyso-Tracker Green(溶酶体绿色荧光探针) |
溶酶体 |
504/511nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
Lyso-Tracker Red(溶酶体红色荧光探针) |
溶酶体 |
577/590nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
线粒体红色荧光探针 |
线粒体 |
578±3/599±4 nm |
是 |
是(甲醛) |
是 |
否 |
否 |
√ |
|||
线粒体绿色荧光探针 |
线粒体 |
490/516nm |
是 |
是(戊二醛) |
是(皂苷) |
是(甲醛) |
是(皂苷) |
√ |
|||
Calcein AM(钙黄绿素AM) |
细胞内 |
494/517 nm |
是 |
是 |
否 |
不能固定 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
iF488-Wheat Germ Agglutinin(WGA,绿光) |
细胞膜 |
493/517 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
不可 |
√ |
|||
iF555-Wheat Germ Agglutinin(WGA,红光) |
细胞膜 |
556/574 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
不可 |
√ |
|||
荧光法脂滴检测试剂盒 |
脂滴 |
493/503 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
不可 |
√ |
√ |
√ |
|
CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒 |
细胞 |
495/519 nm |
是 |
是 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
活性氧(ROS)检测试剂盒 |
细胞 |
488/525nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
MQAE荧光法氯离子检测试剂盒 |
细胞 |
319/462 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
Dihydroethidium (超氧化物阴离子荧光探针) |
细胞 |
520/605nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
Fluo-4 AM荧光法钙离子检测试剂盒 |
细胞 |
494/528 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
BCECF, AM荧光法pH检测试剂盒 |
细胞 |
488/525nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
||
FerroOrange荧光法亚铁离子检测试剂盒 |
细胞 |
543 nm/580 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
葡萄糖摄取检测试剂盒(2-否BDG荧光法) |
细胞 |
488/525nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
组织活性氧(ROS)检测试剂盒(DHE荧光法) |
细胞 |
520/605nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√(细胞) |
√(细胞) |
|
外泌体标记与示踪试剂盒(PKH 26荧光法) |
细胞 |
556/567nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
||
细胞自噬检测试剂盒(MDC活细胞荧光法) |
细胞 |
335/512nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒 |
细胞 |
454/571nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
线粒体钙离子检测试剂盒(Rhod-2 AM荧光法) |
细胞 |
552/581nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
(产品包装升级中,以实物为准。)
400-6027-270