产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
BCECF, AM荧光法pH检测试剂盒 |
KSG1726-100T |
100 T |
产品简介
细胞内pH值对许多细胞活动起着重要作用,例如细胞生长,酶活性,离子运输等过程。BCECF, AM是一种可渗透细胞的pH荧光染料,BCECF, AM本身并无荧光,进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切成BCECF,从而被滞留在细胞内。BCECF对细胞内pH敏感,在490 nm和440 nm波长激发所得到的发射荧光(530 nm)之比与pH有很好的线性关系,比值越高,则pH越高。BCECF, AM不仅被广泛用于哺乳动物细胞的研究,也有报道用于动物组织,植物细胞,细菌和酵母等的细胞内pH水平检测。
本试剂盒基于上述检测原理,以BCECF, AM为主体,并提供专门的配套缓冲液,使用方便,检测更灵敏。可用荧光显微镜、荧光酶标仪等对应的仪器来监测细胞内pH的动态变化。
储存与运输
干冰(dry ice)运输;-20℃避光干燥保存,12个月有效。
组成
Component Number |
Component |
G1726-100T |
KSG1726-1 |
BCECF, AM荧光探针 |
20 μL |
KSG1726-2 |
pH检测缓冲液 |
20 mL |
说明书 |
1份 | |
注意:以上试剂盒反应次数对应96孔板检测体系。
操作步骤
1. 实验前准备工作:将细胞以一定密度提前接种于96孔板,并根据实验目的对细胞进行相应的前处理。
2. BCECF, AM检测工作液配制:根据需要配制BCECF, AM检测工作液,配制体系可参考下表,注意不同细胞特性不同,实验时可根据实际情况添加或减少探针的使用浓度,初次建议稀释比在1:500。
1个样品 |
10个样品 |
100个样品 |
|
BCECF, AM荧光探针 |
0.2 μL |
2 μL |
20 μL |
pH检测缓冲液 |
100 μL |
1 mL |
10 mL |
3. 染色标记(以贴壁细胞为例;悬浮细胞需每次离心换液):
3.1. 去除原有细胞培养基,并使用PBS或其他缓冲液洗涤细胞1-2次。
3.2. 去除洗涤缓冲液,向每孔加入100 μL BCECF, AM检测工作液,避光于37℃细胞培养箱中孵育30 min。
3.3. 孵育结束去除BCECF, AM检测工作液,使用PBS或其他缓冲液洗涤细胞2-3次。注意:要将BCECF, AM检测工作液清洗干净。
3.4. 加入100 μL PBS或其他缓冲液,进行荧光检测。
4. 荧光检测:使用荧光酶标仪等相关仪器对细胞内pH水平进行检测分析。通常BCECF, AM应用到的双激发比值=A/B,(A为EX/EM=490/530 nm;B为EX/EM=440/530 nm),比值升高则pH升高,比值降低则pH降低。
注意事项
1. 由于不同细胞间性质以及前处理方式不同,步骤中描述的使用探针比例以及孵育时间范围仅供参考,可根据具体情况进行调整。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光操作,以减缓荧光猝灭。
3. BCECF, AM对湿度非常敏感,首次使用时,请根据实验安排适当分装,避免反复冻融。BCECF,AM检测工作液请现配现用。
4. 使用前充分震荡以确保其完全溶解。
5. 基于本探针的工作原理,不能对细胞进行固定或穿孔处理。
6. 为了您的健康和安全,操作时请穿好实验服、戴好手套。
本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
货号 |
名称 |
目标物 |
EX/EM |
活细胞染色 |
染色后固定 |
染色后破膜 |
染色前固定 |
染色前破膜 |
荧光酶标仪 |
荧光显微镜 |
流式细胞仪 |
Hoechst 33342染色液(1 mg/mL) |
细胞核 |
350/461 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
√ |
||
Hoechst 33258染液(即用型) |
细胞核 |
350/461 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
||
DAPI染色试剂(即用型) |
细胞核 |
350/461 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
||
细胞核 |
350/461 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
|||
PI染液 |
细胞核 |
535/615 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
√ |
|
iF488-鬼笔环肽 |
细胞骨架 |
493/517 nm |
否 |
否 |
否 |
必需固定 |
是 |
√ |
|||
iF555-鬼笔环肽 |
细胞骨架 |
556/574 nm |
否 |
否 |
否 |
必需固定 |
是 |
√ |
|||
JC-1线粒体膜电位检测试剂盒 |
线粒体 |
585/590;514.529 |
是 |
否 |
否 |
不能固定 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 |
线粒体 |
490/525 nm and 540/590 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
DiO细胞膜绿色荧光染色试剂盒 |
细胞膜 |
484/501 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
|||
DiI细胞膜红色荧光染色试剂盒 |
细胞膜 |
549/565 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
|||
DiD细胞膜荧光染色试剂盒(洋红色) |
细胞膜 |
644/665 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
|||
ER-Tracker Green(内质网绿色荧光探针) |
内质网 |
504/511 nm |
是 |
是 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
ER-Tracker Red(内质网红色荧光探针) |
内质网 |
587/615 nm |
是 |
是 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
Lyso-Tracker Green(溶酶体绿色荧光探针) |
溶酶体 |
504/511nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
Lyso-Tracker Red(溶酶体红色荧光探针) |
溶酶体 |
577/590nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
线粒体红色荧光探针 |
线粒体 |
578±3/599±4 nm |
是 |
是(甲醛) |
是 |
否 |
否 |
√ |
|||
线粒体绿色荧光探针 |
线粒体 |
490/516nm |
是 |
是(戊二醛) |
是(皂苷) |
是(甲醛) |
是(皂苷) |
√ |
|||
Calcein AM(钙黄绿素AM) |
细胞内 |
494/517 nm |
是 |
是 |
否 |
不能固定 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
iF488-Wheat Germ Agglutinin(WGA,绿光) |
细胞膜 |
493/517 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
不可 |
√ |
|||
iF555-Wheat Germ Agglutinin(WGA,红光) |
细胞膜 |
556/574 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
不可 |
√ |
|||
荧光法脂滴检测试剂盒 |
脂滴 |
493/503 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
不可 |
√ |
√ |
√ |
|
CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒 |
细胞 |
495/519 nm |
是 |
是 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
活性氧(ROS)检测试剂盒 |
细胞 |
488/525nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
MQAE荧光法氯离子检测试剂盒 |
细胞 |
319/462 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
Dihydroethidium (超氧化物阴离子荧光探针) |
细胞 |
520/605nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
Fluo-4 AM荧光法钙离子检测试剂盒 |
细胞 |
494/528 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
BCECF, AM荧光法pH检测试剂盒 |
细胞 |
488/525nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
||
FerroOrange荧光法亚铁离子检测试剂盒 |
细胞 |
543 nm/580 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
葡萄糖摄取检测试剂盒(2-否BDG荧光法) |
细胞 |
488/525nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
组织活性氧(ROS)检测试剂盒(DHE荧光法) |
细胞 |
520/605nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√(细胞) |
√(细胞) |
|
外泌体标记与示踪试剂盒(PKH 26荧光法) |
细胞 |
556/567nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
||
细胞自噬检测试剂盒(MDC活细胞荧光法) |
细胞 |
335/512nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒 |
细胞 |
454/571nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
线粒体钙离子检测试剂盒(Rhod-2 AM荧光法) |
细胞 |
552/581nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
(产品包装升级中,以实物为准。)
400-6027-270
湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二路388号生物医药加速器22栋5楼
400-6027-270 