一种以PKH26为荧光探针快速灵敏地标记外泌体,以用于外泌体示踪研究的试剂盒。还可用于细胞膜的标记。其激发为556 nm,发射波长为567 nm。可搭配科普欣Hoechst 33342(KSG1127-1ML)染料标记细胞核,与细胞核共定位,效果更好,结果更直观。
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
外泌体标记与示踪试剂盒(PKH 26荧光法) |
KSG1745-20T |
20T |
产品简介
Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150nm的小囊泡,存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中。外泌体携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。
Exosome具有典型的脂质双分子层结构,本试剂盒是一种利用红色荧光探针PKH 26对外泌体细胞膜进行标记和示踪的试剂盒,当探针与外泌体细胞膜脂质区结合时发出红色荧光,其激发为556 nm,发射波长为567 nm。此外也可用于细胞的体外标记、增殖、示踪研究。
储存与运输
干冰(Dry ice)运输;-80℃保存;6个月有效
组成
Component Number |
Component |
KSG17405-20T |
KSG1745-1 |
PKH 26(1000×) |
20 μL |
KSG1745-2 |
PKH 26稀释缓冲液 |
25 mL |
产品说明书 |
1份 | |
操作步骤
一、 外泌体染色
1. 提取、纯化外泌体,推荐按照本公司的外泌体分离层析柱(KSG4112、KSG4113)。
2. 检测外泌体粒径、浓度,推荐使用NTA检测。
3. 将1 mL 1×1011 Particles/mL的外泌体加入1 μL PKH 26染料,混合均匀。
4. 室温孵育5 min,加入1%的BSA终止染色并吸附多余染料。
5. 再次通过外泌体分离层析柱(KSG4112-5)纯化去除多余染料后可用于后续实验(染色后的外泌体可4℃存放过夜)。
二、 细胞染色(以贴壁培养的细胞为例)
1. 1×PKH 26染色液配制:取1 μL PKH 26(1000×)与1000 μL PKH 26稀释缓冲液充分混匀,配制成1×PKH 26染色液备用(PKH 26探针推荐使用浓度1×-1.5×)。
2. 正常或实验组细胞(汇合度建议50-80%),用PBS洗涤2-3次。
3. 加入1 mL 1×PKH 26染色液,室温避光孵育5 min(不同细胞孵育时间存在差异,可在5-30 min范围内调整)。
4. 加入等体积灭活的血清或1% BSA结合多余的染料,室温等待1 min。(可选)
5. 用完全培养基洗涤2-3次。
6. 可用荧光显微镜直接观察,选择DsRed通道;或重悬细胞后用流式细胞仪检测,选择PE通道(Ex/Em:556/567 nm)。
注意事项
1. 如每次使用的PKH 26探针较少,请视情况分装,尽量避免PKH 26探针反复冻融,-80℃避光保存。
2. PKH 26工作液应现配现用,不能提前配制,否则将影响染色效果。
3. 不同细胞标记后可以示踪的代数和时间差异较大,可根据实际情况或者参考文献进行检测。
4. PKH 26染色前不可固定和通透,染色后可用中性甲醛固定和0.5%的Saponin通透。
5. 悬浮细胞染色时,推荐细胞密度是0.8~1.5×106个/mL。
6. 本产品对光敏感,操作过程尽量避免强光接触。
7. 操作时请穿实验服,佩戴一次性手套。
本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
货号 |
名称 |
目标物 |
EX/EM |
活细胞染色 |
染色后固定 |
染色后破膜 |
染色前固定 |
染色前破膜 |
荧光酶标仪 |
荧光显微镜 |
流式细胞仪 |
Hoechst 33342染色液(1 mg/mL) |
细胞核 |
350/461 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
√ |
||
Hoechst 33258染液(即用型) |
细胞核 |
350/461 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
||
DAPI染色试剂(即用型) |
细胞核 |
350/461 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
||
细胞核 |
350/461 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
|||
PI染液 |
细胞核 |
535/615 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
√ |
|
iF488-鬼笔环肽 |
细胞骨架 |
493/517 nm |
否 |
否 |
否 |
必需固定 |
是 |
√ |
|||
iF555-鬼笔环肽 |
细胞骨架 |
556/574 nm |
否 |
否 |
否 |
必需固定 |
是 |
√ |
|||
JC-1线粒体膜电位检测试剂盒 |
线粒体 |
585/590;514.529 |
是 |
否 |
否 |
不能固定 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 |
线粒体 |
490/525 nm and 540/590 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
DiO细胞膜绿色荧光染色试剂盒 |
细胞膜 |
484/501 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
|||
DiI细胞膜红色荧光染色试剂盒 |
细胞膜 |
549/565 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
|||
DiD细胞膜荧光染色试剂盒(洋红色) |
细胞膜 |
644/665 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
|||
ER-Tracker Green(内质网绿色荧光探针) |
内质网 |
504/511 nm |
是 |
是 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
ER-Tracker Red(内质网红色荧光探针) |
内质网 |
587/615 nm |
是 |
是 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
Lyso-Tracker Green(溶酶体绿色荧光探针) |
溶酶体 |
504/511nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
Lyso-Tracker Red(溶酶体红色荧光探针) |
溶酶体 |
577/590nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
线粒体红色荧光探针 |
线粒体 |
578±3/599±4 nm |
是 |
是(甲醛) |
是 |
否 |
否 |
√ |
|||
线粒体绿色荧光探针 |
线粒体 |
490/516nm |
是 |
是(戊二醛) |
是(皂苷) |
是(甲醛) |
是(皂苷) |
√ |
|||
Calcein AM(钙黄绿素AM) |
细胞内 |
494/517 nm |
是 |
是 |
否 |
不能固定 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
iF488-Wheat Germ Agglutinin(WGA,绿光) |
细胞膜 |
493/517 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
不可 |
√ |
|||
iF555-Wheat Germ Agglutinin(WGA,红光) |
细胞膜 |
556/574 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
不可 |
√ |
|||
荧光法脂滴检测试剂盒 |
脂滴 |
493/503 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
不可 |
√ |
√ |
√ |
|
CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒 |
细胞 |
495/519 nm |
是 |
是 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
活性氧(ROS)检测试剂盒 |
细胞 |
488/525nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
MQAE荧光法氯离子检测试剂盒 |
细胞 |
319/462 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
Dihydroethidium (超氧化物阴离子荧光探针) |
细胞 |
520/605nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
Fluo-4 AM荧光法钙离子检测试剂盒 |
细胞 |
494/528 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
BCECF, AM荧光法pH检测试剂盒 |
细胞 |
488/525nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
||
FerroOrange荧光法亚铁离子检测试剂盒 |
细胞 |
543 nm/580 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
葡萄糖摄取检测试剂盒(2-否BDG荧光法) |
细胞 |
488/525nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
组织活性氧(ROS)检测试剂盒(DHE荧光法) |
细胞 |
520/605nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√(细胞) |
√(细胞) |
|
外泌体标记与示踪试剂盒(PKH 26荧光法) |
细胞 |
556/567nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
||
细胞自噬检测试剂盒(MDC活细胞荧光法) |
细胞 |
335/512nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒 |
细胞 |
454/571nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
线粒体钙离子检测试剂盒(Rhod-2 AM荧光法) |
细胞 |
552/581nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
(产品包装升级中,以实物为准。)
400-6027-270