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组织活性氧(ROS)检测试剂盒(DHE荧光法）

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￥610

产品特点: 以DHE（Dihydroethidium）为荧光探针，快速灵敏地检测组织内超氧阴离子活性氧

货号： KSG1746-100T

规格：

100 T

产品描述

产品信息

产品名称	产品编号	规格
组织活性氧(ROS)检测试剂盒(DHE荧光法）	KSG1746-100T	100T

产品描述

本试剂盒是一种以DHE（Dihydroethidium）为荧光探针，快速灵敏地检测组织内超氧阴离子活性氧的试剂盒。DHE探针在组织中活性氧存在的条件下，被氧化生成溴化乙锭，溴化乙锭可以与细胞内核酸结合，产生红色荧光，红色荧光强度与组织内活性氧水平成正比，可间接判断组织内活性氧的水平，同时也可用于细胞、血清样本的活性氧检测。DHE本身为蓝色荧光，Ex为355 nm，Em为420 nm；当DHE脱氢和核酸结合后显示为红色荧光，Ex为520 nm，Em为605 nm。细胞样本染色后可使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等荧光检测系统进行检测；组织样本需裂解后，使用荧光酶标仪进行检测。

储存与运输

冰袋(wet ice)运输；-20℃保存；6个月有效。

组成

Component Number	Component	KSG17406-100T
KSG1746-1	DHE探针（500×）	20 μL
KSG1746-2	匀浆缓冲液	100 mL
产品说明书		1份

操作步骤

一、 组织样本检测

1. 100×DHE染色液配制：取2 μLDHE探针（500×）与8 μL PBS缓冲液充分混匀，配制成100×DHE染色液备用。

2. 组织样本处理：

a. 取新鲜的组织样本，用PBS洗涤干净。

b. 50 mg组织中加入450 μL匀浆缓冲液（可按比例增减），充分匀浆。

c. 10000 g，4℃离心10 min，弃沉淀，取上清（建议立即检测，或-80℃保存）。

3. 样本检测

a. 在黑色96孔板（推荐货号KHLTP-96-BY）中加入90 μL匀浆缓冲液和10 μL组织匀浆上清。

b. 加入1 μL 100×DHE染色液，混合均匀。

c. 37℃避光孵育20 min，酶标仪设置激发波长520 nm，发射波长设置605 nm检测。

d. 数据分析：荧光强度（RFU)/蛋白质量（蛋白浓度*加入样本的体积），其比值表示组织样本活性氧强度。

二、 血清样本检测

1. 100×DHE染色液配制：取2 μLDHE探针（500×）与8 μL PBS缓冲液充分混匀，配制成100×DHE染色液备用。

2. 样本检测

a. 在黑色96孔板（推荐货号KHLTP-96-BY）中加入50 μL匀浆缓冲液和50 μL血清（可根据样本量来调整血清加样量和匀浆缓冲液的体积）。

b. 加入1 μL 100×DHE染色液，混合均匀。

c. 37℃避光孵育20 min，酶标仪设置激发波长520 nm，发射波长设置605 nm检测。

d. 数据分析：以荧光强度（RFU)/加入样本的体积的比值，表示血清活性氧强度。

三、 活细胞检测

1. DHE染色工作液配制：取2 μL DHE探针（500×）与1 mL PBS充分混匀，配制成1×DHE染色工作液备用。

2. 细胞染色（以下为贴壁细胞6孔板方案，悬浮细胞换液需要离心操作）

a. 正常或处理过后的细胞，用PBS洗涤2-3次。

b. 加入1 mL 1×DHE染色工作液，37℃避光孵育30 min（不同细胞孵育时间存在差异，可在10-60 min范围内调整）。

c. 用PBS洗涤细胞2-3次。

d. 用荧光显微镜可直接观察，选择DsRed通道即可激发；若用酶标仪检测，推荐使用黑底不透明发光板（货号KHLTP-96-BY）检测，设置激发波长520 nm，发射波长605 nm；流式细胞仪检测，选择PE通道。

注意事项

1. 如每次使用的DHE探针较少，请视情况分装，尽量避免DHE探针反复冻融，-20℃或-80℃避光保存。

2. 本产品对光敏感，操作过程尽量避免强光接触。

3. 尽量保持样本新鲜，组织匀浆后短期保存于-80℃的样本。

4. 冰冻细胞样本，可采取组织样本的方式，匀浆后进行检测。

5. 样本检测时，如果结果与预期存在较大差别，可以将组织匀浆液和血清稀释做标曲，在线性范围内选择合适的稀释度进行检测。

6. 操作时请穿实验服，佩戴一次性手套。

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

货号	名称	目标物	EX/EM	活细胞染色	染色后固定	染色后破膜	染色前固定	染色前破膜	荧光酶标仪	荧光显微镜	流式细胞仪
KSG1127-1ML	Hoechst 33342染色液（1 mg/mL）	细胞核	350/461 nm	是	是	是	是	是		√	√
KSG1011-10ML	Hoechst 33258染液（即用型）	细胞核	350/461 nm	否	否	否	是	是		√	√
KSG1012-10ML	DAPI染色试剂（即用型）	细胞核	350/461 nm	否	否	否	是	是		√	√
KSG1012-100ML	DAPI染色试剂（即用型）	细胞核	350/461 nm	否	否	否	是	是		√	√
KSG1021-10ML	PI染液	细胞核	535/615 nm	否	否	否	是	是	√	√	√
KSG1248-100T	iF488-鬼笔环肽	细胞骨架	493/517 nm	否	否	否	必需固定	是		√
KSG1249-100T	iF555-鬼笔环肽	细胞骨架	556/574 nm	否	否	否	必需固定	是		√
KSG1515-100T	JC-1线粒体膜电位检测试剂盒	线粒体	585/590；514.529 525/590；488/525	是	否	否	不能固定	否	√	√	√
KSG1743-100T	JC-10线粒体膜电位检测试剂盒	线粒体	490/525 nm and 540/590 nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1704	DiO细胞膜绿色荧光染色试剂盒	细胞膜	484/501 nm	是	是	是	是	是		√
KSG1705	DiI细胞膜红色荧光染色试剂盒	细胞膜	549/565 nm	是	是	是	是	是		√
KSG1742-100T	DiD细胞膜荧光染色试剂盒（洋红色）	细胞膜	644/665 nm	是	是	是	是	是		√
KSG1720-20UL	ER-Tracker Green（内质网绿色荧光探针）	内质网	504/511 nm	是	是	否	否	否		√
KSG1721-20UL	ER-Tracker Red（内质网红色荧光探针）	内质网	587/615 nm	是	是	否	否	否		√
KSG1722-50UL	Lyso-Tracker Green（溶酶体绿色荧光探针）	溶酶体	504/511nm	是	否	否	否	否		√
KSG1741-50UL	Lyso-Tracker Red（溶酶体红色荧光探针）	溶酶体	577/590nm	是	否	否	否	否		√
KSG1723-50UG	线粒体红色荧光探针	线粒体	578±3/599±4 nm	是	是（甲醛）	是	否	否		√
KSG1740-50UG	线粒体绿色荧光探针	线粒体	490/516nm	是	是（戊二醛）	是(皂苷)	是（甲醛）	是(皂苷)		√
KSG1728-0.1ML	Calcein AM（钙黄绿素AM）	细胞内	494/517 nm	是	是	否	不能固定	否	√	√	√
KSG1730-100UL	iF488-Wheat Germ Agglutinin（WGA，绿光）	细胞膜	493/517 nm	是	是	是	是	不可		√
KSG1731-100UL	iF555-Wheat Germ Agglutinin（WGA，红光）	细胞膜	556/574 nm	是	是	是	是	不可		√
KSG1905-100T	荧光法脂滴检测试剂盒	脂滴	493/503 nm	是	是	是	是	不可	√	√	√
KSG1616-2000T	CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒	细胞	495/519 nm	是	是	否	否	否	√	√	√
KSG1706-100T	活性氧(ROS)检测试剂盒	细胞	488/525nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1725-100T	MQAE荧光法氯离子检测试剂盒	细胞	319/462 nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1904-100T	Dihydroethidium (超氧化物阴离子荧光探针)	细胞	520/605nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1724-100T	Fluo-4 AM荧光法钙离子检测试剂盒	细胞	494/528 nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1726-100T	BCECF, AM荧光法pH检测试剂盒	细胞	488/525nm	是	否	否	否	否	√	√
KSG1727-100T	FerroOrange荧光法亚铁离子检测试剂盒	细胞	543 nm/580 nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1744-200UL	葡萄糖摄取检测试剂盒（2-否BDG荧光法）	细胞	488/525nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1746-100T	组织活性氧（ROS)检测试剂盒(DHE荧光法）	细胞	520/605nm	是	否	否	否	否	√	√（细胞）	√（细胞）
KSG1745-20T	外泌体标记与示踪试剂盒（PKH 26荧光法）	细胞	556/567nm	是	否	否	否	否		√	√
KSG1749-100T	细胞自噬检测试剂盒（MDC活细胞荧光法）	细胞	335/512nm	是	否	否	否	否		√
KSG1747-100T	线粒体通透性转换孔（MPTP）检测试剂盒	细胞	454/571nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1748-200T	线粒体钙离子检测试剂盒（Rhod-2 AM荧光法）	细胞	552/581nm	是	否	否	否	否	√	√	√

（产品包装升级中，以实物为准。）

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