产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒 |
KSG1616-2000T |
2000T |
产品简介
CFDA SE是二乙酸荧光素(FDA)的衍生物,是一种可穿透细胞膜的荧光染料,本身不具有荧光发光性,当通过被动运输进入活细胞后,可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE),发出强烈的绿色荧光,共价结合的荧光分子很少从细胞内脱落。CFDA SE染料可用于检测细胞增殖,CFDA SE可随着细胞的分裂增殖而被子代细胞均匀继承,其含量的衰减与细胞分裂次数成正比,该荧光信号可在 488 nm的激发光下进行检测,并可通过流式细胞仪进行分析。
本试剂盒,是一款使用荧光探针CFDA SE对细胞增殖进行荧光示踪检测的试剂盒,相比MTT法或[3H]-thymidine掺入等其它细胞增殖检测方法,具有更稳定,更灵敏,细胞毒性更低的优势,经CFDA SE标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,且不会使邻近细胞染色。CFDA SE标记的细胞呈绿色荧光,Ex=494 nm,Em=521 nm,可以用流式细胞仪或者荧光显微镜进行检测。
储存与运输
冰袋(wet ice)运输;-20℃避光保存,12个月有效。
组成
Component Number |
Component |
KSG1616-2000T |
KSG1616-1 |
CFDA SE荧光探针 |
1 管 |
KSG1616-2 |
CFDA SE溶剂 |
1 mL |
KSG1616-3 |
CFDA SE染色缓冲液(10×) |
100 mL*2 |
说明书 |
1份 | |
操作步骤
1. 染色前准备
(1) CFDA SE 储存液(2000×)的配制:CFDA SE荧光探针,10000 rpm离心1 min使干粉沉于管底,取1 mL CFDA SE溶剂加入到CFDA SE荧光探针中,涡旋溶解并混匀。
注意:配制CFDA SE储存液需在超净工作台中避光操作,配制后可按照每次实验需求用量进行分装,置于-20°C 冰箱中密封避光保存,并于1个月内使用完,最长不宜超过2个月;-70℃避光保存可以适当延长使用时间。
(2) CFDA SE染色缓冲液(1×)的配制:准备适量无菌的超纯水,根据实验需要配制适量的CFDA SE细胞染色缓冲液(1×)。例如:取1 mL CFDA SE细胞染色缓冲液(10×),加入9 mL无菌超纯水,混匀后即为CFDA SE细胞染色缓冲液(1×)。配制好的CFDA SE细胞染色缓冲液(1×)可以4℃保存,长时间不用可以-20℃保存。
(3) CFDA SE染色工作液的配制:取1 μL CFDA SE储存液(2000×)至2 mL CFDA SE染色缓冲液(1×)中,混匀后即为CFDA SE染色工作液,现配现用。
2. 细胞染色
(1) 在15 mL离心管中收集100万至500万个细胞,PBS清洗一次,200g离心5分钟,弃上清,加入1 mL CFDA SE染色工作液,将管内细胞重悬。
(2) 37℃孵育10分钟。
(3) 加入约10 mL完全细胞培养液(含血清),室温颠倒数下混匀。
(4) 室温200g离心5分钟,弃上清,再用5-10 mL完全细胞培养液洗涤一次。
(5) 再加入5-10 mL完全细胞培养液,37℃孵育5分钟,以促进CFDA SE在细胞内的驻留及未反应的CFDA SE进入完全细胞培养液。
(6) 200g离心去上清,完成最后一次洗涤,随后即可按照细胞的正常培养方法进行培养。
3. 细胞增殖检测
可以在合适的时间点,直接用荧光显微镜观察标记效果;也可以在培养适当时间后用流式细胞仪检测细胞增殖。或将标记后的细胞移植到活体动物,用荧光进行示踪。
标记的细胞呈绿色荧光;激发波长Ex=492 nm(荧光FITC滤片/488 nm流式激发光),发射波长Em=517 nm。
注意事项
1. CFDA SE干粉较稳定,配制储存液后应分装并置于-20°C冰箱中密封避光保存,并于1个月内使用完。
2. 不同细胞的内酯酶活性不同,因此染色效果具有差异性。可根据细胞类型及培养条件摸索最佳工作浓度,可使用0.5×~2×的染料浓度染色测验。
3. 试剂中含有荧光染料,保存或进行标记时尽量避光操作,以避免荧光淬灭问题。
4. 若需要对细胞进行固定,请用醛类固定剂如3.7%多聚甲醛于室温固定15 min;之后若还需要进行其他如抗体标记,请用冰丙酮透化处理细胞10 min。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
货号 |
名称 |
目标物 |
EX/EM |
活细胞染色 |
染色后固定 |
染色后破膜 |
染色前固定 |
染色前破膜 |
荧光酶标仪 |
荧光显微镜 |
流式细胞仪 |
Hoechst 33342染色液(1 mg/mL) |
细胞核 |
350/461 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
√ |
||
Hoechst 33258染液(即用型) |
细胞核 |
350/461 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
||
DAPI染色试剂(即用型) |
细胞核 |
350/461 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
||
细胞核 |
350/461 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
|||
PI染液 |
细胞核 |
535/615 nm |
否 |
否 |
否 |
是 |
是 |
√ |
√ |
√ |
|
iF488-鬼笔环肽 |
细胞骨架 |
493/517 nm |
否 |
否 |
否 |
必需固定 |
是 |
√ |
|||
iF555-鬼笔环肽 |
细胞骨架 |
556/574 nm |
否 |
否 |
否 |
必需固定 |
是 |
√ |
|||
JC-1线粒体膜电位检测试剂盒 |
线粒体 |
585/590;514.529 |
是 |
否 |
否 |
不能固定 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 |
线粒体 |
490/525 nm and 540/590 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
DiO细胞膜绿色荧光染色试剂盒 |
细胞膜 |
484/501 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
|||
DiI细胞膜红色荧光染色试剂盒 |
细胞膜 |
549/565 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
|||
DiD细胞膜荧光染色试剂盒(洋红色) |
细胞膜 |
644/665 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
是 |
√ |
|||
ER-Tracker Green(内质网绿色荧光探针) |
内质网 |
504/511 nm |
是 |
是 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
ER-Tracker Red(内质网红色荧光探针) |
内质网 |
587/615 nm |
是 |
是 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
Lyso-Tracker Green(溶酶体绿色荧光探针) |
溶酶体 |
504/511nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
Lyso-Tracker Red(溶酶体红色荧光探针) |
溶酶体 |
577/590nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
线粒体红色荧光探针 |
线粒体 |
578±3/599±4 nm |
是 |
是(甲醛) |
是 |
否 |
否 |
√ |
|||
线粒体绿色荧光探针 |
线粒体 |
490/516nm |
是 |
是(戊二醛) |
是(皂苷) |
是(甲醛) |
是(皂苷) |
√ |
|||
Calcein AM(钙黄绿素AM) |
细胞内 |
494/517 nm |
是 |
是 |
否 |
不能固定 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
iF488-Wheat Germ Agglutinin(WGA,绿光) |
细胞膜 |
493/517 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
不可 |
√ |
|||
iF555-Wheat Germ Agglutinin(WGA,红光) |
细胞膜 |
556/574 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
不可 |
√ |
|||
荧光法脂滴检测试剂盒 |
脂滴 |
493/503 nm |
是 |
是 |
是 |
是 |
不可 |
√ |
√ |
√ |
|
CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒 |
细胞 |
495/519 nm |
是 |
是 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
活性氧(ROS)检测试剂盒 |
细胞 |
488/525nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
MQAE荧光法氯离子检测试剂盒 |
细胞 |
319/462 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
Dihydroethidium (超氧化物阴离子荧光探针) |
细胞 |
520/605nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
Fluo-4 AM荧光法钙离子检测试剂盒 |
细胞 |
494/528 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
BCECF, AM荧光法pH检测试剂盒 |
细胞 |
488/525nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
||
FerroOrange荧光法亚铁离子检测试剂盒 |
细胞 |
543 nm/580 nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
葡萄糖摄取检测试剂盒(2-否BDG荧光法) |
细胞 |
488/525nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
组织活性氧(ROS)检测试剂盒(DHE荧光法) |
细胞 |
520/605nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√(细胞) |
√(细胞) |
|
外泌体标记与示踪试剂盒(PKH 26荧光法) |
细胞 |
556/567nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
||
细胞自噬检测试剂盒(MDC活细胞荧光法) |
细胞 |
335/512nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
|||
线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒 |
细胞 |
454/571nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
|
线粒体钙离子检测试剂盒(Rhod-2 AM荧光法) |
细胞 |
552/581nm |
是 |
否 |
否 |
否 |
否 |
√ |
√ |
√ |
(产品包装升级中,以实物为准。)
400-6027-270