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CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒
¥1100
产品特点: 一种基于荧光探针CFDA SE对细胞增殖进行荧光示踪检测的试剂盒,更稳定,更灵敏,细胞毒性更低
货号: KSG1616-2000T
规格:

产品信息

产品名称

产品编号

规格

CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒

KSG1616-2000T

2000T



产品简介

CFDA SE是二乙酸荧光素(FDA)的衍生物,是一种可穿透细胞膜的荧光染料,本身不具有荧光发光性,当通过被动运输进入活细胞后,可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE),发出强烈的绿色荧光,共价结合的荧光分子很少从细胞内脱落。CFDA SE染料可用于检测细胞增殖,CFDA SE可随着细胞的分裂增殖而被子代细胞均匀继承,其含量的衰减与细胞分裂次数成正比,该荧光信号可在 488 nm的激发光下进行检测,并可通过流式细胞仪进行分析。

本试剂盒,是一款使用荧光探针CFDA SE对细胞增殖进行荧光示踪检测的试剂盒,相比MTT法或[3H]-thymidine掺入等其它细胞增殖检测方法,具有更稳定,更灵敏,细胞毒性更低的优势,经CFDA SE标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,且不会使邻近细胞染色。CFDA SE标记的细胞呈绿色荧光,Ex=494 nm,Em=521 nm,可以用流式细胞仪或者荧光显微镜进行检测。


储存与运输

冰袋(wet ice)运输;-20℃避光保存,12个月有效。


组成

Component Number

Component

KSG1616-2000T

KSG1616-1

CFDA SE荧光探针

1 管

KSG1616-2

CFDA SE溶剂

1 mL

KSG1616-3

CFDA SE染色缓冲液(10×)

100 mL*2

说明书

1份



操作步骤

1. 染色前准备

(1) CFDA SE 储存液(2000×)的配制:CFDA SE荧光探针,10000 rpm离心1 min使干粉沉于管底,取1 mL CFDA SE溶剂加入到CFDA SE荧光探针中,涡旋溶解并混匀。

注意:配制CFDA SE储存液需在超净工作台中避光操作,配制后可按照每次实验需求用量进行分装置于-20°C 冰箱中密封避光保存,并于1个月内使用完,最长不宜超过2个月;-70℃避光保存可以适当延长使用时间。

(2) CFDA SE染色缓冲液(1×)的配制:准备适量无菌的超纯水,根据实验需要配制适量的CFDA SE细胞染色缓冲液(1×)。例如:取1 mL CFDA SE细胞染色缓冲液(10×),加入9 mL无菌超纯水,混匀后即为CFDA SE细胞染色缓冲液(1×)。配制好的CFDA SE细胞染色缓冲液(1×)可以4℃保存,长时间不用可以-20℃保存。

(3) CFDA SE染色工作液的配制:取1 μL CFDA SE储存液(2000×)至2 mL CFDA SE染色缓冲液(1×)中,混匀后即为CFDA SE染色工作液,现配现用。

2. 细胞染色

(1) 在15 mL离心管中收集100万至500万个细胞,PBS清洗一次,200g离心5分钟,弃上清,加入1 mL CFDA SE染色工作液,将管内细胞重悬。

(2) 37℃孵育10分钟。

(3) 加入约10 mL完全细胞培养液(含血清),室温颠倒数下混匀。

(4) 室温200g离心5分钟,弃上清,再用5-10 mL完全细胞培养液洗涤一次。

(5) 再加入5-10 mL完全细胞培养液,37℃孵育5分钟,以促进CFDA SE在细胞内的驻留及未反应的CFDA SE进入完全细胞培养液。

(6) 200g离心去上清,完成最后一次洗涤,随后即可按照细胞的正常培养方法进行培养。

3. 细胞增殖检测

可以在合适的时间点,直接用荧光显微镜观察标记效果;也可以在培养适当时间后用流式细胞仪检测细胞增殖。或将标记后的细胞移植到活体动物,用荧光进行示踪。

标记的细胞呈绿色荧光;激发波长Ex=492 nm(荧光FITC滤片/488 nm流式激发光),发射波长Em=517 nm。


注意事项

1. CFDA SE干粉较稳定,配制储存液后应分装并置于-20°C冰箱中密封避光保存,并于1个月内使用完。

2. 不同细胞的内酯酶活性不同,因此染色效果具有差异性。可根据细胞类型及培养条件摸索最佳工作浓度,可使用0.5×~2×的染料浓度染色测验。

3. 试剂中含有荧光染料,保存或进行标记时尽量避光操作,以避免荧光淬灭问题。

4. 若需要对细胞进行固定,请用醛类固定剂如3.7%多聚甲醛于室温固定15 min;之后若还需要进行其他如抗体标记,请用冰丙酮透化处理细胞10 min。

5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。



产品仅供科研用途,不用于临床诊断!


货号

名称

目标物

EX/EM

活细胞染色

染色后固定

染色后破膜

染色前固定

染色前破膜

荧光酶标仪

荧光显微镜

流式细胞仪

KSG1127-1ML

Hoechst 33342染色液(1 mg/mL)

细胞核

350/461 nm


KSG1011-10ML

Hoechst 33258染液(即用型)

细胞核

350/461 nm


KSG1012-10ML

DAPI染色试剂(即用型)

细胞核

350/461 nm


KSG1012-100ML

细胞核

350/461 nm


KSG1021-10ML

PI染液

细胞核

535/615 nm

KSG1248-100T

iF488-鬼笔环肽

细胞骨架

493/517 nm

必需固定



KSG1249-100T

iF555-鬼笔环肽

细胞骨架

556/574 nm

必需固定



KSG1515-100T

JC-1线粒体膜电位检测试剂盒

线粒体

585/590;514.529
525/590;488/525

不能固定

KSG1743-100T

JC-10线粒体膜电位检测试剂盒

线粒体

490/525 nm and 540/590 nm

KSG1704

DiO细胞膜绿色荧光染色试剂盒

细胞膜

484/501 nm



KSG1705

DiI细胞膜红色荧光染色试剂盒

细胞膜

549/565 nm



KSG1742-100T

DiD细胞膜荧光染色试剂盒(洋红色)

细胞

644/665 nm



KSG1720-20UL

ER-Tracker Green(内质网绿色荧光探针)

内质网

504/511 nm



KSG1721-20UL

ER-Tracker Red(内质网红色荧光探针)

内质网

587/615 nm



KSG1722-50UL

Lyso-Tracker Green(溶酶体绿色荧光探针)

溶酶体

504/511nm



KSG1741-50UL

Lyso-Tracker Red(溶酶体红色荧光探针)

溶酶体

577/590nm



KSG1723-50UG

线粒体红色荧光探针

线粒体

578±3/599±4 nm

是(甲醛)



KSG1740-50UG

线粒体绿色荧光探针

线粒体

490/516nm

是(戊二醛)

是(皂苷)

是(甲醛)

是(皂苷)



KSG1728-0.1ML

Calcein AM(钙黄绿素AM)

细胞内

494/517 nm

不能固定

KSG1730-100UL

iF488-Wheat Germ Agglutinin(WGA,绿光)

细胞膜

493/517 nm

不可



KSG1731-100UL

iF555-Wheat Germ Agglutinin(WGA,红光)

细胞

556/574 nm

不可



KSG1905-100T

荧光法脂滴检测试剂盒

脂滴

493/503 nm

不可

KSG1616-2000T

CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒

细胞

495/519 nm

KSG1706-100T

活性氧(ROS)检测试剂盒

细胞

488/525nm

KSG1725-100T

MQAE荧光法氯离子检测试剂盒

细胞

319/462 nm

KSG1904-100T

Dihydroethidium (超氧化物阴离子荧光探针)

细胞

520/605nm

KSG1724-100T

Fluo-4 AM荧光法钙离子检测试剂盒

细胞

494/528 nm

KSG1726-100T

BCECF, AM荧光法pH检测试剂盒

细胞

488/525nm


KSG1727-100T

FerroOrange荧光法亚铁离子检测试剂盒

细胞

543 nm/580 nm

KSG1744-200UL

葡萄糖摄取检测试剂盒(2-否BDG荧光法)

细胞

488/525nm

KSG1746-100T

组织活性氧(ROS)检测试剂盒(DHE荧光法)

细胞

520/605nm

√(细胞)

√(细胞)

KSG1745-20T

外泌体标记与示踪试剂盒(PKH 26荧光法)

细胞

556/567nm


KSG1749-100T

细胞自噬检测试剂盒(MDC活细胞荧光法)

细胞

335/512nm



KSG1747-100T

线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒

细胞

454/571nm

KSG1748-200T

线粒体钙离子检测试剂盒(Rhod-2 AM荧光法)

细胞

552/581nm



(产品包装升级中,以实物为准。


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