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细胞自噬检测试剂盒（MDC染色法）

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￥220

产品特点: 通过MDC荧光染色观察细胞自噬体的动态变化，用于监测细胞自噬的形成。

货号： KSG1749-100T

规格：

100 T （细胞自噬检测试剂盒（MDC染色法））

1 mL （自噬诱导剂-辛伐他汀（Simvastatin））

1 mL （自噬抑制剂-氯喹（Chloroquine））

产品描述

通过MDC荧光染色观察细胞自噬体的动态变化，用于监测细胞自噬的形成。MDC染料激发波长为335nm（330-360nm均可），发射波长为512 nm（510-540nm均可）可根据实验方案选择不同规格科普欣细胞培养板进行检测实验。

产品信息

产品名称	产品编号	规格
细胞自噬检测试剂盒（MDC活细胞荧光法）	KSG1749-100T	100T

产品简介

细胞自噬（Autophagy），是细胞内环境中的一种降解和循环的机制，通过溶酶体降解自身受损或多余的细胞器和蛋白质等物质，，从而维持细胞内环境稳定，为细胞提供能量和营养物质。在应对饥饿、缺氧和病原体感染等应激状态时，细胞自噬发挥重要保护作用，与多种疾病发生发展密切相关（如神经退行性疾病、癌症、代谢综合征等）。

本产品是一款基于MDC染色原理的细胞自噬检测试剂盒，主要成分是丹酰尸胺，又称单丹磺酰尸胺（Monodansylcadaverine, MDC）。MDC是一种嗜酸性的荧光色素，可通过离子捕获方式（ion trapping）和膜脂的特异性结合，从而特异性标记自噬体（Autophagosome）。推荐的激发波长为335 nm (330-360 nm均可)，发射波长为512 nm (510-540 nm均可）。

本产品可用于活细胞或者组织的自噬荧光染色，不能用于冻存的或固定的细胞、组织或者组织切片的染色检测。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；MDC染料（100×）-20℃保存，12个月有效；MDC染料稀释液2-8℃保存，12个月有效。

组成

Component Number	Component	KSG1749-100T
KSG1749-1	MDC染料（100×）	1 mL
KSG1749-2	MDC染料稀释液	2×100 mL
说明书		1份

操作步骤

一、实验前准备

1. 提前准备未经诱导自噬的对照细胞和处理诱导自噬的细胞，诱导自噬推荐自噬诱导剂（KSG2273），也可根据实验需求自行准备。

2. 取出MDC染料（100×）和MDC染料稀释液，恢复室温后按照MDC染料（100×）：MDC染料稀释液=1：100的体积比，混合配制形成MDC染料工作液（1×），避光室温放置备用。

3. 提前准备HBSS或PBS缓冲液，平衡至室温，用于细胞清洗。

二、贴壁细胞染色（以6孔板为例）

1. 诱导自噬结束后，吸出并丢弃6孔板中液体，用缓冲液洗涤1-3次。后续染色操作请注意避光。

2. 吸出并丢弃缓冲液，每孔加入1 mL的MDC染料工作液（1×），转移细胞至37ºC细胞培养箱中避光孵育10 min-30 min。

3. 吸出并丢弃MDC染料工作液（1×），用缓冲液洗涤1-3次。

4. 吸出并丢弃缓冲液，再加入1 mL缓冲液保湿。

5. 使用荧光酶标仪进行荧光检测；或在荧光显微镜下用紫外激发光激发，观察绿色荧光。推荐的激发波长为335 nm (330-360 nm均可)，发射波长为512 nm (510-540 nm均可)。

三、悬浮细胞染色

1. 诱导自噬结束后，收集悬浮细胞，1000 rpm室温离心5 min，去除离心上清液，用缓冲液洗涤1-3次。后续染色操作请注意避光。

2. 吸出并丢弃缓冲液，每50-100万个细胞加入1 mL的MDC染料工作液（1×），重悬细胞，细胞放置于37℃细胞培养箱中避光孵育10 min-30 min。

3. 1000 rpm室温离心5 min，去上清，吸出并丢弃MDC染料工作液（1×），加入缓冲液洗涤1-3次。

4. 吸出并丢弃缓冲液，再加入0.5 mL缓冲液重悬保湿。

5. 使用荧光酶标仪进行荧光检测；悬浮细胞可以进行细胞涂片，在荧光显微镜下用紫外激发光激发，观察绿色荧光。推荐的激发波长为335 nm (330-360 nm均可)，发射波长为512 nm (510-540 nm均可)。

注意事项

1. 本产品MDC染料有一定的毒性，请小心操作和注意防护。

2. 诱导自噬后，细胞状态会变差，MDC染色后，出现贴壁细胞变圆、脱落是正常现象。可以使用多聚赖氨酸、明胶等预处理细胞培养板，然后再进行细胞培养。

3. MDC对光照特别敏感，操作过程中请尽量注意避光。

4. 染色过强，可以考虑缩短染色时间；染色过弱，可以考虑适当延长染色时间。

5. 本产品染料嗜酸，染色时正常的细胞也会有一定的染色背景。

6. 本产品不能用于冻存或固定的细胞、组织或者组织切片的染色检测。

7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

货号	名称	目标物	EX/EM	活细胞染色	染色后固定	染色后破膜	染色前固定	染色前破膜	荧光酶标仪	荧光显微镜	流式细胞仪
KSG1127-1ML	Hoechst 33342染色液（1 mg/mL）	细胞核	350/461 nm	是	是	是	是	是		√	√
KSG1011-10ML	Hoechst 33258染液（即用型）	细胞核	350/461 nm	否	否	否	是	是		√	√
KSG1012-10ML	DAPI染色试剂（即用型）	细胞核	350/461 nm	否	否	否	是	是		√	√
KSG1012-100ML	DAPI染色试剂（即用型）	细胞核	350/461 nm	否	否	否	是	是		√	√
KSG1021-10ML	PI染液	细胞核	535/615 nm	否	否	否	是	是	√	√	√
KSG1248-100T	iF488-鬼笔环肽	细胞骨架	493/517 nm	否	否	否	必需固定	是		√
KSG1249-100T	iF555-鬼笔环肽	细胞骨架	556/574 nm	否	否	否	必需固定	是		√
KSG1515-100T	JC-1线粒体膜电位检测试剂盒	线粒体	585/590；514.529 525/590；488/525	是	否	否	不能固定	否	√	√	√
KSG1743-100T	JC-10线粒体膜电位检测试剂盒	线粒体	490/525 nm and 540/590 nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1704	DiO细胞膜绿色荧光染色试剂盒	细胞膜	484/501 nm	是	是	是	是	是		√
KSG1705	DiI细胞膜红色荧光染色试剂盒	细胞膜	549/565 nm	是	是	是	是	是		√
KSG1742-100T	DiD细胞膜荧光染色试剂盒（洋红色）	细胞膜	644/665 nm	是	是	是	是	是		√
KSG1720-20UL	ER-Tracker Green（内质网绿色荧光探针）	内质网	504/511 nm	是	是	否	否	否		√
KSG1721-20UL	ER-Tracker Red（内质网红色荧光探针）	内质网	587/615 nm	是	是	否	否	否		√
KSG1722-50UL	Lyso-Tracker Green（溶酶体绿色荧光探针）	溶酶体	504/511nm	是	否	否	否	否		√
KSG1741-50UL	Lyso-Tracker Red（溶酶体红色荧光探针）	溶酶体	577/590nm	是	否	否	否	否		√
KSG1723-50UG	线粒体红色荧光探针	线粒体	578±3/599±4 nm	是	是（甲醛）	是	否	否		√
KSG1740-50UG	线粒体绿色荧光探针	线粒体	490/516nm	是	是（戊二醛）	是(皂苷)	是（甲醛）	是(皂苷)		√
KSG1728-0.1ML	Calcein AM（钙黄绿素AM）	细胞内	494/517 nm	是	是	否	不能固定	否	√	√	√
KSG1730-100UL	iF488-Wheat Germ Agglutinin（WGA，绿光）	细胞膜	493/517 nm	是	是	是	是	不可		√
KSG1731-100UL	iF555-Wheat Germ Agglutinin（WGA，红光）	细胞膜	556/574 nm	是	是	是	是	不可		√
KSG1905-100T	荧光法脂滴检测试剂盒	脂滴	493/503 nm	是	是	是	是	不可	√	√	√
KSG1616-2000T	CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒	细胞	495/519 nm	是	是	否	否	否	√	√	√
KSG1706-100T	活性氧(ROS)检测试剂盒	细胞	488/525nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1725-100T	MQAE荧光法氯离子检测试剂盒	细胞	319/462 nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1904-100T	Dihydroethidium (超氧化物阴离子荧光探针)	细胞	520/605nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1724-100T	Fluo-4 AM荧光法钙离子检测试剂盒	细胞	494/528 nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1726-100T	BCECF, AM荧光法pH检测试剂盒	细胞	488/525nm	是	否	否	否	否	√	√
KSG1727-100T	FerroOrange荧光法亚铁离子检测试剂盒	细胞	543 nm/580 nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1744-200UL	葡萄糖摄取检测试剂盒（2-否BDG荧光法）	细胞	488/525nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1746-100T	组织活性氧（ROS)检测试剂盒(DHE荧光法）	细胞	520/605nm	是	否	否	否	否	√	√（细胞）	√（细胞）
KSG1745-20T	外泌体标记与示踪试剂盒（PKH 26荧光法）	细胞	556/567nm	是	否	否	否	否		√	√
KSG1749-100T	细胞自噬检测试剂盒（MDC活细胞荧光法）	细胞	335/512nm	是	否	否	否	否		√
KSG1747-100T	线粒体通透性转换孔（MPTP）检测试剂盒	细胞	454/571nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1748-200T	线粒体钙离子检测试剂盒（Rhod-2 AM荧光法）	细胞	552/581nm	是	否	否	否	否	√	√	√