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iF555-Wheat Germ Agglutinin（WGA，红光）

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￥1400

产品特点: 常用于标记哺乳动物细胞、革兰氏阳性菌和酵母的细胞膜，以及骨骼和心脏骶膜等

货号： KSG1731-100UL

规格：

100 μL （WGA，绿光） 100 μL （WGA，红光）

产品描述

产品信息

产品名称	产品编号	规格
iF555-Wheat Germ Agglutinin（WGA，红光）	KSG1731	100UL

产品简介

小麦胚芽凝集素（WGA）是一种与N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸结合的凝集素。它是目前研究最多、应用最广泛的一类凝集素。WGA与糖缀合物结合，其衍生物和缀合物被广泛用于标记细胞膜和纤维化瘢痕组织，用于荧光成像和分析。WGA的碳水化合物结合特异性针对β-1,4-GlcNAc连接的残基序列，即壳糊精。每个单体含有两个相同的、非相互作用的结合位点，它们与3或4个β-1,4-GlcNAc单元互补。在检测的单糖中，只有GlcNAc与WGA结合，ManNAc不结合，GalNAc仅弱结合。WGA与含有Gal β（1-4）GlcNAc β（1-3）（即聚氨基乳糖型聚糖）重复序列的大型低聚糖中的内部GlcNAc残基具有高亲和力结合。N-乙酰神经氨酸仅参与WGA的低亲和力相互作用。WGA显示出复杂的糖特异性模式，可用于复杂碳水化合物的结构分析。WGA的iFluor®555缀合物能表现出iFluor®555染料的明亮和红色荧光。iFluor®555- WGA缀合物与唾液酸和N-乙酰葡糖胺基残基结合，与AF555 WGA偶联物一样。

小麦胚芽凝集素 (WGA) 是一种36kDa的凝集素，由于它可与细胞膜上的N-乙酰基-β-D-葡糖胺基残基和N-乙酰基-β-D-葡糖胺低聚物偶联的特性，通常用于标记哺乳动物细胞、革兰氏阳性菌和酵母的细胞膜，以及心肌细胞膜等。当WGA用于心肌细胞染色时，可将心肌细胞细胞膜染出来，这样是不是肥大的细胞从图像与正常组的对比就可以看出，也可以用专门的软件对染出的细胞进行直径、面积等的测量，能够分析心肌细胞是否肥大。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，有效期12个月。

组成

Component	KSG1731-100UL
iF555-Wheat Germ Agglutinin（WGA，红光）	100 μL
说明书	1份

实验前准备

1. 自备1×PBS缓冲液（pH 7.2-7.4，推荐KSG4202），含3.0-4.0%甲醛的固定液（推荐KSG1101，含4% PFA），抗荧光淬灭封片剂（推荐KSG1401），即用型DAPI染色液（推荐KSG1012）等。

2. 第一次使用本产品时，将充分融化的本产品低速离心1 min，防止液体管壁损失。建议根据单次实验使用量进行分装，防止溶剂挥发损失。置于-20℃避光保存。

3. 正式实验前，吸取5 μL iF555-Wheat Germ Agglutinin（WGA，红光）与1 mL PBS混匀，即得到iF555-WGA工作液。不同类型的细胞染色效果可能不同，最佳染色工作浓度请参考文献或进行预实验摸索。iF555-WGA工作液现配现用，室温避光保存，当天使用。

操作步骤

活细胞染色（以12孔板为例）

1. 用1×PBS缓冲液清洗细胞2次。

2. 每孔细胞加入100 μL iF555-WGA工作液，37℃下避光孵育10-30 min。注意密封，防止液体蒸发。

3. 孵育完成后，用1×PBS缓冲液缓冲液清洗细胞3次，每次5 min。

4. 以荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察结果。

固定细胞染色（以6孔板细胞爬片为例）

1. 培养好的细胞爬片（密度至少达到50%汇合度），去除培养液，用37℃预热的1×PBS缓冲液清洗细胞2次。

2. 加入适量固定液覆盖细胞，室温固定10-30 min。

3. 吸除固定液，用1×PBS缓冲液室温清洗细胞2-3次，每次10 min。

4. 细胞爬片稍微甩干后，用组化笔画圈使细胞位于圈中央。取100 μLiF555-WGA工作液完全覆盖细胞，37℃避光孵育30 min。注意密封，防止液体蒸发干片。

5. 孵育完成后，用1×PBS缓冲液清洗细胞3次，每次5 min。

6. （可选做）向爬片上滴加即用型DAPI染色液覆盖细胞，进行细胞核染色8 min。用1×PBS缓冲液清洗细胞2-3次，每次30 s-1 min。

7. 细胞爬片稍甩干后，倒置在滴加一滴抗荧光淬灭封片剂的载玻片上，用纸巾吸掉多余封片剂。

【注意】步骤6和7，可采用含DAPI的抗荧光淬灭封片剂（推荐KSG1407）代替，同时完成染核和封片。

8. 荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察结果，选择555（Ex/Em=493/517 nm）和DAPI（Ex/Em=364/454 nm）通道。

组织切片染色

1. 组织切片前处理：

冰冻切片（新鲜组织冰冻切片或固定组织冰冻切片）室温静置数分钟，恢复至室温；切片浸没在固定液中室温固定10-15 min，取出自然晾干，然后以纯水或1×PBS缓冲液中润洗，去掉组织上残存的固定液。

石蜡切片脱蜡复水；

将组织切片（石蜡切片或固定组织冰冻切片）置于盛满EDTA抗原修复缓冲液（pH 8.0）的修复盒中于微波炉内进行抗原修复。中火8 min停火8 min转中低火7 min，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。自然冷却后将玻片置于1×PBS缓冲液中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5 min。

2. 染色：组织切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈。向圈内滴加50-100 μLiF555-WGA工作液覆盖组织，37℃避光孵育30 min。注意密封，防止液体蒸发干片。

3. 洗涤：孵育完成后，用1×PBS缓冲液清洗样本3次，每次5 min。

4. 染核（可选）：向样本上滴加即用型DAPI染色液覆盖细胞，进行细胞核染色8 min。用1×PBS缓冲液清洗样本2-3次，每次30 s-1 min。

5. 封片：切片稍甩干后，在样本上滴加一滴抗荧光淬灭封片剂，用合适的盖玻片进行封片。

【注意】步骤4和5，可采用含DAPI的抗荧光淬灭封片剂（推荐KSG1407）代替，同时完成染核和封片。

6. 镜检：荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察结果，选择555（Ex/Em=556/574 nm）和DAPI（Ex/Em=364/454 nm）通道。

注意事项

1. 经过长时间固定后的样本（如石蜡切片），必须经过高温修复过程，否则阳性结果偏弱或接近于无。

2. WGA染色做心肌分析时对心肌组织要求较高，必须保证组织完整、均匀，最好提供石蜡切片的标本。

3. 对于细胞样本，染色前避免使用通透液，否则会造成细胞质结构成分着色。

4. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快完成检测及观察拍照。

5. 操作时请穿实验服，并佩戴一次性手套。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

货号	名称	目标物	EX/EM	活细胞染色	染色后固定	染色后破膜	染色前固定	染色前破膜	荧光酶标仪	荧光显微镜	流式细胞仪
KSG1127-1ML	Hoechst 33342染色液（1 mg/mL）	细胞核	350/461 nm	是	是	是	是	是		√	√
KSG1011-10ML	Hoechst 33258染液（即用型）	细胞核	350/461 nm	否	否	否	是	是		√	√
KSG1012-10ML	DAPI染色试剂（即用型）	细胞核	350/461 nm	否	否	否	是	是		√	√
KSG1012-100ML	DAPI染色试剂（即用型）	细胞核	350/461 nm	否	否	否	是	是		√	√
KSG1021-10ML	PI染液	细胞核	535/615 nm	否	否	否	是	是	√	√	√
KSG1248-100T	iF488-鬼笔环肽	细胞骨架	493/517 nm	否	否	否	必需固定	是		√
KSG1249-100T	iF555-鬼笔环肽	细胞骨架	556/574 nm	否	否	否	必需固定	是		√
KSG1515-100T	JC-1线粒体膜电位检测试剂盒	线粒体	585/590；514.529 525/590；488/525	是	否	否	不能固定	否	√	√	√
KSG1743-100T	JC-10线粒体膜电位检测试剂盒	线粒体	490/525 nm and 540/590 nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1704	DiO细胞膜绿色荧光染色试剂盒	细胞膜	484/501 nm	是	是	是	是	是		√
KSG1705	DiI细胞膜红色荧光染色试剂盒	细胞膜	549/565 nm	是	是	是	是	是		√
KSG1742-100T	DiD细胞膜荧光染色试剂盒（洋红色）	细胞膜	644/665 nm	是	是	是	是	是		√
KSG1720-20UL	ER-Tracker Green（内质网绿色荧光探针）	内质网	504/511 nm	是	是	否	否	否		√
KSG1721-20UL	ER-Tracker Red（内质网红色荧光探针）	内质网	587/615 nm	是	是	否	否	否		√
KSG1722-50UL	Lyso-Tracker Green（溶酶体绿色荧光探针）	溶酶体	504/511nm	是	否	否	否	否		√
KSG1741-50UL	Lyso-Tracker Red（溶酶体红色荧光探针）	溶酶体	577/590nm	是	否	否	否	否		√
KSG1723-50UG	线粒体红色荧光探针	线粒体	578±3/599±4 nm	是	是（甲醛）	是	否	否		√
KSG1740-50UG	线粒体绿色荧光探针	线粒体	490/516nm	是	是（戊二醛）	是(皂苷)	是（甲醛）	是(皂苷)		√
KSG1728-0.1ML	Calcein AM（钙黄绿素AM）	细胞内	494/517 nm	是	是	否	不能固定	否	√	√	√
KSG1730-100UL	iF488-Wheat Germ Agglutinin（WGA，绿光）	细胞膜	493/517 nm	是	是	是	是	不可		√
KSG1731-100UL	iF555-Wheat Germ Agglutinin（WGA，红光）	细胞膜	556/574 nm	是	是	是	是	不可		√
KSG1905-100T	荧光法脂滴检测试剂盒	脂滴	493/503 nm	是	是	是	是	不可	√	√	√
KSG1616-2000T	CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒	细胞	495/519 nm	是	是	否	否	否	√	√	√
KSG1706-100T	活性氧(ROS)检测试剂盒	细胞	488/525nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1725-100T	MQAE荧光法氯离子检测试剂盒	细胞	319/462 nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1904-100T	Dihydroethidium (超氧化物阴离子荧光探针)	细胞	520/605nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1724-100T	Fluo-4 AM荧光法钙离子检测试剂盒	细胞	494/528 nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1726-100T	BCECF, AM荧光法pH检测试剂盒	细胞	488/525nm	是	否	否	否	否	√	√
KSG1727-100T	FerroOrange荧光法亚铁离子检测试剂盒	细胞	543 nm/580 nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1744-200UL	葡萄糖摄取检测试剂盒（2-否BDG荧光法）	细胞	488/525nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1746-100T	组织活性氧（ROS)检测试剂盒(DHE荧光法）	细胞	520/605nm	是	否	否	否	否	√	√（细胞）	√（细胞）
KSG1745-20T	外泌体标记与示踪试剂盒（PKH 26荧光法）	细胞	556/567nm	是	否	否	否	否		√	√
KSG1749-100T	细胞自噬检测试剂盒（MDC活细胞荧光法）	细胞	335/512nm	是	否	否	否	否		√
KSG1747-100T	线粒体通透性转换孔（MPTP）检测试剂盒	细胞	454/571nm	是	否	否	否	否	√	√	√
KSG1748-200T	线粒体钙离子检测试剂盒（Rhod-2 AM荧光法）	细胞	552/581nm	是	否	否	否	否	√	√	√

（产品包装升级中，以实物为准。）

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