400-6027-270
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
Uracil-DNA Glycosylase（UDG） |
KSG3419-1000U |
1000 U |
产品简介
Uracil-DNA Glycosylase简称UDG，来源于大肠杆菌，可催化含尿嘧啶的 DNA 链中的尿嘧啶(dU)碱基和脱氧核糖之间的 N-糖苷键发生水解，从而释放游离尿嘧啶。Uracil-DNA Glycosylase (UDG)可以水解含有dU的单链或双链DNA，但不能水解RNA或含有dU的长度不超过6个碱基DNA寡聚体。UDG主要用于消除PCR扩增过程中带来的产物污染问题。
来源：来源于大肠杆菌，由大肠杆菌重组表达。
酶活定义：在37℃条件下，1 min内催化60 pmol尿嘧啶从含尿嘧啶的双链DNA上释放所需的酶量定义为一个酶活单位。通过30 min内从50 μL含0.2 μg DNA (104-105cpm/µg)的反应体系中释放[3H]-尿嘧啶的量来确定酶活。
纯度及浓度：SDS-PAGE检测纯度≥95%；5 U/μL。
失活：95℃孵育10 min可以使95% UDG失活。
酶存储buffer：10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，0.1 mg/mL BSA，50%glycerol，pH 7.4。
10х UDG Reactin buffer：200 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA, 10 mM DTT, pH 8.0。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，12个月有效期。
组成
Component Number |
Component |
KSG3419-1000U |
KSG3419-1 |
Uracil-DNA Glycosylase（UDG） |
200 μL |
KSG3419-2 |
10х UDG Reactin buffer |
1 mL |
说明书 |
1份 | |
操作步骤
1. 按照下表配置反应体系：
Component |
Volume |
Nuclease-Free water |
To 50 μL |
10х PCR Reactin buffer |
5 μL |
dNTP/dUTP(2.5 mM each/5 mM) |
4 μL |
Primer Mix(10 μM each) |
4 μL |
Template |
x μL |
Taq DNA polymerase（5 U/μL） |
0.25 μl |
Uracil-DNA Glycosylase（UDG） |
0.2 μL |
2. 反应体系配置好后充分混匀，37℃孵育10 min（本步骤可以有效去除可能之前含dUTP的PCR产物污染）。
3. 后续可以立即进入PCR扩增程序。
注意事项
1. UDG酶在大多数PCR反应缓冲液体系中均有活性，但对于自行使用的PCR或RT-PCR体系，首次使用时建议先测试一下是否和所使用的体系兼容。
2. 酶的取用都应放在冰盒内，使用完毕后立即存储于-20℃。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
（产品包装升级中，以实物为准。）
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