400-6027-270
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
Thermostable RNase H |
KSG3418-250U |
250 U |
产品简介
本产品RNase H (Thermostable)，即耐热核糖核酸酶H，来源于Thermus thermophilus，是一种在较高温度（65℃以上）下仍然保持活性的核糖核酸内切酶。RNase H (Thermostable)与常见的E.coli RNase H有类似的酶学性质，特异性地水解DNA-RNA杂合链中的RNA，水解产物为5′磷酸末端的寡核糖核苷酸和单链DNA，不能水解单链或双链DNA或RNA。RNase H (Thermostable)在65℃以上条件下仍具有很高的酶活性，其在70℃时的半衰期可达几个小时，在95℃的半衰期仍可达30 min左右。本产品与常见的E.coli RNase H用途类似，主要用于cDNA第二条链合成前去除mRNA、去除与poly（dT）杂交的mRNA中的poly（A）、通过DNA序列实现对RNA的定点剪切等。
来源：来源于嗜热菌，由大肠杆菌重组表达。
酶活定义：在50℃条件下，在50 μL体系中，20 min内水解40 pmol荧光标记的含有25个碱基对的杂合链（RNA/DNA）底物产生1 nmol核糖核苷酸所需的酶量定义为一个酶活单位。
纯度及浓度：SDS-PAGE检测纯度≥95%；5 U/μL。
失活或抑制：加入适量蛋白酶K或者加入5%体积的0.5 M EDTA。
酶存储buffer：50 mM Tris-HCl，1 M NaCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，50%Glycerol，pH 7.5。
10х Reaction buffer：500 mM Tris-HCl，30 mM MgCl2，100 mM DTT，pH 8.3。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，12个月有效期。
组成
Component Number |
Component |
KSG3418-250U |
KSG3418-1 |
Thermostable RNase H |
50 μL |
KSG3418-2 |
10х Reaction buffer |
200 μL |
说明书 |
1份 | |
操作步骤
DNA-RNA杂合连中去除RNA：
1. 按照下表配置反应体系：
Component |
Volume |
Nuclease-Free water |
To 20 μL |
DNA-RNA杂合链 |
≤2 μg |
10х Reaction buffer |
2 μL |
Thermostable RNase H |
1 μL |
注：上述体系中DNA-RNA杂合链不超过2 μg。
2. 反应体系于50℃孵育20 min；
3. 反应完成后加入适量蛋白酶K或者加入5%体积的0.5 M EDTA终止反应。
注意事项
1. 本产品的最佳反应温度高于65℃，在95℃时仍具有活性，其在65℃时的活性是在37℃时的3-4倍。
2. 酶的取用都应放在冰盒内，使用完毕后立即存储于-20℃。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
（产品包装升级中，以实物为准。）
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