400-6027-270
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
RNase H（E.coli） |
KSG3417-100U |
100 U |
产品简介
本产品RNase H，即核糖核酸酶H，来源于大肠杆菌，是一种核糖核酸内切酶。RNase H特异性地水解DNA-RNA杂合链中的RNA，水解产物为5′磷酸末端的寡核糖核苷酸和单链DNA，不能水解单链或双链DNA或RNA。本产品主要用于cDNA第二条链合成前去除mRNA、去除与poly（dT）杂交的mRNA中的poly（A）、通过DNA序列实现对RNA的定点剪切等。
来源：来源于大肠杆菌，由大肠杆菌重组表达。
酶活定义：在37℃条件下，20 min内催化1 nmol杂合双链中的RNA形成酸可溶性核糖核苷酸所需的酶量定义为一个酶活单位。
纯度及浓度：SDS-PAGE检测纯度≥95%；2 U/μL。
失活或抑制：65℃孵育20 min即可失活；金属离子螯合剂和巯基封闭剂均能抑制RNase H活性。
酶存储buffer：10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，200μg/mL BSA，50%Glycerol，pH 7.4。
10х Reaction buffer：500 mM Tris-HCl，30 mM MgCl2，10 mM DTT，pH 8.3。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，12个月有效期。
组成
Component Number |
Component |
KSG3417-100U |
KSG3417-1 |
RNase H（E.coli） |
50 μL |
KSG3417-2 |
10х Reaction buffer |
300 μL |
说明书 |
1份 | |
操作步骤
DNA-RNA杂合连中去除RNA：
1. 利用逆转录酶合成cDNA第一条链后，70℃孵育10 min终止反应；
2. 在冰浴上向20 μL反应体系中依次加入2 μL 10х Reaction buffer、适量 Nuclease-Free water和0.5-1 μL RNase H，充分混匀；
3. 反应体系于37℃孵育1 h；
4. 反应完成后65℃孵育20 min终止反应。
注意事项
1. 酶的取用都应放在冰盒内，使用完毕后立即存储于-20℃。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
（产品包装升级中，以实物为准。）
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