400-6027-270
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
Exonuclease III（E.coli） |
KSG3465-5000U |
5000 U |
产品简介
Exonuclease III（E.coli）是来源于大肠杆菌的外切核酸酶Ⅲ，由大肠杆菌重组表达，表现出4种催化活性。3‘-5’脱氧核糖核酸外切酶活性对双链DNA具有特异性，从3‘OH末端方向逐步切去5’-单核苷酸，其最佳底物为平末端、5‘突出端或缺口双链DNA。其在DNA 3’-突出端（至少4个碱基长，且不带有3‘-末端C-残基）、单链DNA或硫代磷酸酯连接的核苷酸上不具有活性。Exonuclease III（E.coli）具有3’磷酸酶活性可以去除3‘-末端磷酸基团，生成一个3’-OH基团。其RNase H活性可以以核酸外切酶方式降解RNA-DNA杂交体中的RNA链。无嘌呤/无嘧啶-核酸内切酶活性在无嘌呤或无嘧啶位点切割磷酸二酯键，产生5'-末端（无碱基脱氧核糖5'-磷酸残基）。主要用于DNA双脱氧测序的单链模板制备、定点突变、链特异性探针制备等。
来源：来源于大肠杆菌，由大肠杆菌重组表达。
酶活定义：在37℃、pH 8.0条件下，30 min内产生1 nmol的酸可溶性物质所需的酶量定义为一个酶活单位。
纯度及浓度：SDS-PAGE检测纯度≥95%；100 U/μL。
失活：70℃孵育20 min即可失活
酶存储buffer：25 mM Tris-HCl，50 mM KCl，0.5 mM DTT，50%Glycerol，pH 8.0。
10х Reaction buffer：500 mM Tri-HCl，100 mM MgCl2，10 mM DTT，pH 8.0。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，12个月有效期。
组成
Component Number |
Component |
KSG3465-5000U |
KSG3465-1 |
Exonuclease III（E.coli） |
50 μL |
KSG3465-2 |
10х Reaction buffer |
500 μL |
说明书 |
1份 | |
操作步骤
1. 按照下表配置反应体系：
Component |
Volume |
DNA样品 |
≤5 μg |
10х Reaction buffer |
5 μL |
Exonuclease III（E.coli） |
0.5 μL |
Nuclease-Free water |
To 50 μL |
2. 将反应体系充分混匀，于37℃孵育30 min。
3. 反应完成后，70℃孵育20 min终止反应。即可进行后续实验操作。
注意事项
1. 酶的取用都应放在冰盒内，使用完毕后立即存储于-20℃。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
（产品包装升级中，以实物为准。）
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