400-6027-270
高通量双磁珠法质粒DNA提取试剂盒（预封装48T）
￥530
产品特点:
双磁珠法，无需离心，提取更快，30min即可完成，可搭配全自动核酸提取仪从大肠杆菌中提取高质量质粒DNA
货号：
KSG3759-48T
规格：
双磁珠法，可从大肠杆菌中高通量提取质粒DNA，无需离心，提取更快，30min即可完成。可搭配科普欣全自动核酸提取仪Y-16/Y-48使用。采用“手动裂解结合+仪器自动纯化”的分段式设计，可替代繁琐耗时的乙醇沉淀步骤及手工漂洗步骤。提取的质粒可直接用于酶切、连接、克隆、PCR及杂交等下游分子生物学实验。
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
高通量双磁珠法质粒DNA提取试剂盒（预封装48T） |
KSG3759-48T |
48T |
产品简介
本产品基于自主研发的超顺磁性纳米磁珠，配套Cookbio Y-16、Y-48等全自动核酸提取仪使用，可解决大肠杆菌质粒DNA高通量提取需求。该体系采用“手动裂解结合+仪器自动纯化”的分段式设计，能在温和条件下实现对质粒DNA的高效、特异性吸附，全流程仅需30 min完成，可替代当前耗时、繁琐的乙醇沉淀步骤以及多次手工漂洗步骤。从1-5ml过夜培养的大肠杆菌中能提取 5-50 μg质粒。提取的质粒DNA纯度高、完整性好，无抑制剂残留，可直接用于酶切、连接、克隆、PCR及杂交等下游分子生物学实验，显著提升实验通量与操作效率。
储存与运输
RNaseA冰袋（wet ice）运输，-20℃保存；其他试剂室温运输，室温储存；有效期12个月。
组成
Component Number |
Component |
KSG3759-48T |
KSG3759-1 |
Buffer P1 |
12 mL |
KSG3759-2 |
Buffer P2 |
12 mL |
KSG3759-3 |
Buffer P3 |
12 mL |
KSG3759-4 |
RNaseA |
240 µL |
KSG3759-5 |
BactBind 磁珠 |
6 mL |
KSG3759-6 |
96孔预封装板 |
3块 |
KSG3759-7 |
8孔磁棒套 |
6条 |
说明书 |
1份 |
|
使用前须知（请仔细阅读）
1. 检查预封装板是否漏液，如果出现此类现象，请勿使用。
2. 使用前观察磁珠或试剂是否粘在封口膜或试剂预分装板孔壁上，如有此现象可上下混匀后短暂离心或于桌面上轻轻敲击试剂预分装板底部至液滴掉落后再使用。
3. Buffer P2如有沉淀现象，请于37℃加热溶解，待恢复至室温后使用。
4. 使用前将RNaseA全部加入到Buffer P1里，于 4℃保存，可保存6个月。
操作步骤
1. 裂解与澄清
1) 1.5ml离心管中处理
a) 取1-5 mL过夜培养的菌液，12,000 rpm离心1 min，收集于1.5 mL离心管中，吸弃上清；
b) 加入200 μL已混有RNase A的Buffer P1，使用移液器或涡旋仪彻底分散菌体；
c) 加入200 μL Buffer P2，温和地上下颠倒8-10次使菌体充分裂解，形成透明溶液（此步骤不宜超过5 min）；
d) 加入200μL的Buffer P3，立即温和上下颠倒8–10次充分混匀（此时会出现白色沉淀），加入100μL的BactBind 磁珠颠倒混匀10-20次静置2min后将离心管移至磁力架（KYSCS-0212）上静置30 s，将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次，使管壁残留的磁珠冲刷下来，待上清清澈后，取上清（约500 μL）。
2) 96孔深孔板中处理
a) 取1-5ml过夜培养的菌液，3000 rpm离心5 min，弃上清收集于96孔深孔板中；
b) 加入200 μl已混有RNase A的Buffer P1，使用移液枪吹打或涡旋混匀仪震荡彻底分散菌体；
c) 加入200 μl Buffer P2，封膜（KSG6067/KSG6065）后立即温和上下颠倒8-10次充分混匀，形成透明溶液（此步骤不宜超过5 min）；
d) 加入200 μl的Buffer P3，封膜（KSG6067/KSG6065）后立即温和上下颠倒8-10次充分混匀（此时会出现白色沉淀），加入100μl BactBind 磁珠封膜（KSG6067/KSG6065）后立即温和上下颠倒10-20次充分混匀后放到磁力架上吸磁2min取上清（约500μl）。
2. 将所取上清加入96孔深孔板1/7列。
3. Y-16、Y-48 全自动核酸提取仪参数设置：
步骤 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
工位 |
3 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
4 |
等待时间 |
00:00:00 |
00:00:00 |
00:00:00 |
00:00:00 |
00:03:00 |
00:00:00 |
00:03:00 |
00:00:00 |
混合模式a |
2 |
2 |
2 |
2 |
2 |
2 |
2 |
2 |
混合时间 |
00:00:10 |
00:03:00 |
00:00:30 |
00:00:30 |
00:00:30 |
00:00:30 |
00:01:00 |
00:00:10 |
是否暂停 |
Ⓧ |
Ⓧ |
Ⓧ |
Ⓧ |
Ⓧ |
Ⓧ |
Ⓧ |
Ⓧ |
吸磁时间a |
00:00:20 |
00:00:20 |
00:00:20 |
00:00:20 |
00:00:20 |
00:00:20 |
00:00:30 |
00:00:00 |
体积（µL） |
870 |
1000 |
500 |
800 |
800 |
800 |
80 |
800 |
温度（℃） |
--- |
25.0℃ |
--- |
--- |
--- |
--- |
--- |
--- |
a：如果不使用Cookbio Y-16、Y-48全自动核酸提取仪，可根据其他适配本产品的仪器说明书调整吸磁时间和混合模式参数。
4. 安装磁套，运行程序。
5. 自动化提取步骤完成后将第6列和第12列孔位中的质粒DNA溶液小心转移到新的Nuclease-free离心管中并于-20℃长期保存。
注意事项
1. 操作之前，请务必认真阅读本产品说明书。
2. 请勿将预装板倒置。
3. 请勿长时间干燥磁珠，以免影响核酸洗脱效率。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
附操作流程简图
产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
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