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背景荧光漂白试剂
¥1100
产品特点: 背景荧光漂白仪(ZWX-20)专用试剂,去除背景荧光或标记荧光,背景更干净,荧光信号更准更真实。
货号: KSG1411-1L

背景荧光漂白仪(ZWX-20)专用试剂,去除生物样本中的自发光和背景荧光。通过化学反应加光照的共同作用,改变荧光基团共轭结构,降低荧光基团的激发效率,即可达到去除背景荧光的效果。与仪器操作简便,且不影响组织形态结构的完整性,不影响各种抗体与核酸的标记效果。


产品信息

产品名称

产品编号

规格

背景荧光漂白试剂

KSG1411-1L

1 L


产品简介

生物样本中很多成份具有较强的自发光(如动物组织中的红细胞、弹力纤维、胶原纤维、脂褐素、粘液物质等,植物组织中的叶绿素、香豆素类、黄酮类化合物等)以及固定过程中各种醛类化合物(甲醛,福尔马林以及戊二醛等)交联蛋白等产生较强的背景荧光。这些自发光和背景荧光在荧光标记实验中会极大地干扰目标荧光信号的观察。为得到更高信噪比的荧光实验结果,需要在荧光标记之前对组织的自发光及背景光彻底淬灭去除。

本背景荧光漂白试剂和我司背景荧光漂白仪(ZWX-20)联合使用,通过化学反应加光照的共同作用,改变荧光基团共轭结构(质子化或去质子化),降低荧光基团的激发效率,即可达到去除背景荧光的效果。该试剂与仪器操作简便,且不影响组织形态结构的完整性,不影响各种抗体与核酸的标记效果。


储存与运输

室温避光保存与运输,12个月有效期。


组成

Component Number

Component

KSG1411-1L

KSG1411-1

背景荧光漂白试剂A液

 1000 mL

KSG1411-2

背景荧光漂白试剂B液 

50 mL

说明书

1份



操作步骤

1. 切片前处理:

石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入环保型脱蜡液(KSG1128)Ⅰ10 min-环保型脱蜡液(KSG1128)Ⅱ 10 min-环保型脱蜡液(KSG1128)Ⅲ10 min-无水乙醇Ⅰ5 min-无水乙醇Ⅱ5 min-无水乙醇Ⅲ5 min-蒸馏水洗。

冰冻切片固定:冰冻切片室温晾干,37℃烘箱烘烤10-20 min,浸于甲醇中固定1h,于PBS(KSG2156,pH 7.4)中在钟摆摇床(KYSYC-Z100)上晃动洗涤3次,每次5 min。

2. 抗原修复:根据组织类型及抗体种类,选择对应的抗原修复液(KSG1219, pH 6.0;KSG1207, pH 8.0;KSG1218, pH 9.0)及修复方式进行抗原修复。推荐使用我司抗原修复仪(KYARI-4)修复。此过程中应防止修复液过度蒸发,切勿干片。自然冷却后将玻片置于PBS(KSG2156,pH 7.4)中在钟摆摇床(KYSYC-Z100)上晃动洗涤3次,每次5 min。

3. 配制背景荧光漂白试剂工作液:按照背景荧光漂白试剂A液∶背景荧光漂白试剂B液=19∶1的比例配制好背景荧光漂白试剂工作液,试剂需现用现配,配制后的试剂需密封避光。

4. 背景自发光淬灭处理:组织切片用免疫组化笔(KSG6100)画圈后PBS(KSG2156,pH 7.4)润洗,将切片平放于湿盒(KHSIB-20F)中。用移液器或滴管在圈内滴加背景荧光漂白试剂工作液,保证组织被试剂完全覆盖。湿盒底部加少量水,保持湿润。将湿盒放置于背景荧光漂白仪(ZWX-20)中,一般动物组织背景荧光淬灭处理10 min;植物组织背景荧光淬灭处理处理10 min 后,更换一次淬灭试剂后再处理10 min,即可去除背景自发光。

5. 清洗:背景自发光去除处理完成后,取出切片,于PBS(KSG2156,pH 7.4)中在钟摆摇床上晃动洗涤3次,每次5 min。

6. 染色或抗体标记:背景自发光淬灭处理以后的切片,按照荧光特染或抗体标记流程正常操作即可。


注意事项

1. 本产品在配制及使用时,需要避光。

2. 组织样本类型不同,背景荧光去除时所需时间和次数也会有差异。在背景荧光淬灭时可通过显微镜镜检,根据背景荧光淬灭效果调整淬灭的时间和次数,确保背景荧光全部去除。一般动物组织背景荧光使用背景荧光漂白仪(ZWX-20)处理10 min即可,植物组织背景荧光使用背景荧光漂白仪(ZWX-20)处理10 min后,更换新的淬灭试剂后再处理10 min即可。

3. 操作时请穿实验服,并佩戴一次性手套。


产品仅供科研用途,不用于临床诊断!


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