利用TSA技术,通过HRP催化酪胺高密度沉积,实现低丰度靶标的高灵敏度荧光信号放大并节约抗体;同时支持快速淬灭,完美适配多轮多重标记实验,确保各轮信号清晰无干扰。
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
Cy3-Tyramide |
KSG1223-50UL |
50 μL |
产品简介
酪胺信号放大技术(Tyramide signal amplification,简称TSA),是一类利用HRP对靶标抗原进行高密度原位标记的酶学检测方法,可以应用于IF/IHC的信号放大。TSA技术主要原理:在过氧化氢H2O2存在时,辣根过氧化物酶HRP可以催化酪胺为一种非常活跃的短寿命中间体,在短时间内,中间体可以共价结合到周围蛋白的富电子表面形成酪胺化复合物,大量富集成以酶为中心的类似“岛”状的聚集团,因使用荧光染料标记的酪胺,使得抗原-抗体结合部位形成大量的荧光素沉积,实现信号放大。
酪胺信号放大技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪胺的信号放大技术能够提供极强的灵敏度、检测极微量的目的抗原。酪胺信号放大技术极大的降低抗体的用量,节约抗体。酪胺信号放大试剂盒可与传统染色方法结合使用实现多色成像,也可以顺序进行两个或更多个酪胺反应标记同一个样品上的不同靶标,因此可使用不同的荧光酪胺反复标记实现多重荧光染色。
产品特性
超高标记灵敏度:凭借TSA信号放大技术,可实现低丰度抗原的精准定位,抗体标记过程中荧光信号强且稳定,完全满足免疫荧光染色及结果扫描的需求。
可控淬灭特性:荧光信号对持续激发光耐受性低,在荧光淬灭仪(ZL-8)和荧光淬灭试剂(KSG1271)联合处理下,可快速、彻底淬灭荧光信号,无残留信号不干扰下一轮实验。
多轮标记适配:完美兼容荧光多轮多重标记实验,既能在单轮抗体标记中提供阳性强度高且清晰的荧光信号,又能在淬灭步骤中快速消除荧光,不干扰后续多轮抗体标记实验结果。
储存与运输
冰袋(wet ice)运输;-20℃保存,有效期12个月。
组成
Component Number |
Component |
G1223-50UL |
KSG1223 |
Cy3-Tyramide |
50 μL |
说明书 |
1份 | |
注意事项
1. 本产品解冻后若有不溶沉淀,充分涡旋混匀促进溶解后可继续使用。试剂使用前使用离心机进行短暂离心后,用干净吸头吹吸混匀后取用。
2. 与荧光二抗相比,TSA试剂盒有更高的灵敏度和更强的信号。因此一抗使用浓度需降低,一般在抗体说明书建议的稀释比基础上再扩大5-10倍,以减少非特异性结合导致的背景荧光。建议设置一抗梯度浓度获得最佳效果。
3. 如背景荧光较强,建议增加组织自发荧光淬灭步骤。
4. 荧光Tyramide的建议稀释比是1:300,可根据实验结果调整稀释比例(建议稀释比例范围1:100 - 1:500)。
5. 稀释液需自备,为含0.003 % H2O2的1×TBST(推荐KSG2150)。1×TBST(推荐KSG2150)100 mL,加入100 μL 3 % H2O2,混匀即可。该稀释液容易失效,建议现配现用。
6. 如进行多重荧光标记,建议先孵育多抗,后孵育单抗;先孵育高丰度目的蛋白对应的抗体,再孵育低丰度目的蛋白对应的抗体。具体操作步骤可参考本公司TSAPLus荧光多标(1-7种标记,2-8色荧光)染色试剂盒(KSG1226,KSG1236,KSG1255,KSG1256,KSG1257,KSG1259)。
7. 操作时请穿实验服,并佩戴一次性手套。
可根据荧光成像系统的光源图谱选择不同荧光染料组合,开展TSA荧光多标。
TSA系列荧光染色试剂盒相关荧光染料的荧光光谱数据如下:
荧光染料类型 |
产品货号 |
Ex/Em (nm) |
DAPI |
KSG1012 |
359/457 |
iF440-Tyramide |
KSG1250 |
434/480 |
iF488-Tyramide |
KSG1231 |
491/516 |
FITC-Tyramide |
KSG1222 |
498/517 |
iF546-Tyramide |
KSG1251 |
541/557 |
Cy3-Tyramide |
KSG1223 |
555/569 |
iF555-Tyramide |
KSG1233 |
557/570 |
iF594-Tyramide |
KSG1242 |
588/604 |
iF647-Tyramide |
KSG1232 |
656/670 |
iF700-Tyramide |
KSG1252 |
690/713 |
iF750-Tyramide |
KSG1258 |
757/779 |
产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
(产品包装升级中,以实物为准。)
400-6027-270