SDS-PAGE凝胶制备试剂盒-制胶试剂盒（手动）-科普欣生物 Cookbio 抗体|仪器|耗材|试剂-武汉科普欣生物科技有限公司

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SDS-PAGE凝胶制备试剂盒

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￥110

产品特点: 可配置任意浓度凝胶，通过凝胶浓度计算各试剂添加量，可单独补充上层胶指示染料

货号： KSG2003-50T

规格：

50 T （SDS-PAGE凝胶制备试剂盒） 50 T （SDS-PAGE 凝胶快速制备试剂盒）

关联产品：

一步法免染超快制胶（Tris-甘氨酸）一步法手动梯度制胶（Tris-甘氨酸）一步法超快制胶（Tris-甘氨酸）超快制胶（Tris-甘氨酸）高分辨超快制胶（Bis-Tris） Tris-Acetate大分子/Tris-Tricine小分子常规制胶（Tris-甘氨酸）

产品描述

产品信息

产品名称	产品编号	规格
SDS-PAGE凝胶制备试剂盒	KSG2003-50T	50T

产品简介

本产品SDS-PAGE凝胶制备试剂盒，包含凝胶制备所需的所有试剂，用户只需准备少量纯水及制胶设备（制胶底座、玻璃板、梳子等），按照说明书操作即可制得所需凝胶。本试剂盒可制备常规大小凝胶至少50块。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；改良型促凝剂-20℃保存，其他2-8℃避光保存，有效期12个月。

组成

Component Number	Component	KSG2003-50T
KSG2003-1	1.5 M Tris-HCl（pH 8.8）	100 mL
KSG2003-2	30% 丙烯酰胺（29:1）	100 mL
KSG2003-3	1.0 M Tris-HCl（pH 6.8）	20 mL
KSG2003-4	10% SDS	5mL
KSG2003-5	PAGE凝胶催化剂	1 mL
KSG5036-5ML	改良型促凝剂	1 mL×5
说明书		1份

使用方法

1. 根据目的蛋白分子量和所选电泳缓冲液不同，选择合适浓度的SDS-PAGE下层胶，参照表格如下（2-8kDa大小蛋白建议使用Tricine体系制胶试剂盒KSG2159）：

SDS-PAGE分离胶浓度	最佳分离范围（kDa）（Tris-Glycine电泳缓冲液，KSG2018）	最佳分离范围（kDa）（SWE快速高分辨电泳缓冲液，KSG2081）
6%	50-300	15-300
8%	30-130	10-250
10%	20-100	10-150
12%	10-60	8-100
15%

2. 根据目标蛋白分子量大小，选取分离胶的浓度，以常用规格8.3 cm×7.3 cm凝胶板（单块）为例，可参考下表配制胶液：

分离胶浓度	6%			8%			10%			12%			15%
玻璃板厚度（mm）	0.75	1.0	1.5	0.75	1.0	1.5	0.75	1.0	1.5	0.75	1.0	1.5	0.75	1.0	1.5
所需制胶液总体积（mL）^*	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0
H₂O（mL）	2.12	3.18	4.24	1.85	2.78	3.7	1.59	2.38	3.17	1.32	1.98	2.64	0.92	1.38	1.84
30%丙烯酰胺（29:1）（mL）	0.8	1.2	1.6	1.07	1.6	2.14	1.33	2.0	2.67	1.6	2.4	3.2	2.0	3.0	4.0
1.5 M Tris-HCl（pH 8.8）（mL）	1.0	1.5	2.0	1.0	1.5	2.0	1.0	1.5	2.0	1.0	1.5	2.0	1.0	1.5	2.0
10% SDS（µL）	40	60	80	40	60	80	40	60	80	40	60	80	40	60	80
改良型促凝剂（µL）	24	36	48	24	36	48	24	36	48	24	36	48	24	36	48
PAGE凝胶催化剂（µL）	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0	4.0	6.0	8.0

*制胶液总体积不包含PAGE凝胶催化剂的体积。

浓缩胶配制可参考下表：

浓缩胶浓度(%)	5%
H₂O/mL	1.93	2.95	3.86	5.79
30%丙烯酰胺（29:1）/mL	0.5	0.75	1.0	1.5
1.0M Tris-HCl（pH 6.8）/mL	0.5	0.75	1.0	1.5
10%SDS/μL	40	60	80	120
改良型促凝剂/μL	18	27	36	54
PAGE凝胶催化剂/μL	4.0	6.0	8.0	12.0
总体积^*/mL	3.0	4.5	6.0	9.0

^*总体积不包含PAGE凝胶催化剂的体积。

3. 推荐电泳条件：

a. 使用SWE快速高分辨电泳缓冲液（KSG2081）进行电泳：200-250 V恒压，25-35 min可完成电泳；

b. 使用Tris-Glycine电泳缓冲液（KSG2018）进行电泳：设置电压上层胶90 V，电泳约30 min（marker进入分离胶）；下层胶调整电压为150-180 V，约60-90 min(可根据实际情况调整)。

注意事项

1. 温差过大制胶过程产热可能会产生气泡，建议将胶液配好后恢复至室温，再加改良型促凝剂进行灌胶，可有效避免凝胶过程中细小气泡的形成。

2. 改良型促凝剂相较于过硫酸铵（AP）稳定性更好，使用时拿出一支，使用结束后于4℃保存，以便后续常规使用，可保存六个月；若长期不用请放置于-20℃保存，避免反复冻融。

3. 小于10 kDa的蛋白分离建议使用Tricine胶，丙烯酰胺凝胶可能不足以分离。

4. 温度对于胶的凝固时间影响较大，为保证实验顺利进行，一般温度越低，凝固时间越长，可适当增加改良型促凝剂用量；温度越高凝胶越快，可适当减少改良型促凝剂用量。

5. 凝胶需要充分的凝固时间，建议胶制好充分静置确保凝胶彻底。

6. 当温度较低时，10%SDS溶液有结晶析出，于37℃复温融化后可继续使用。

7. 如需快速制胶试剂，可购买本公司其他产品，如SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒（KSG2037），或超快速彩色凝胶配制试剂盒系列（KSG2041、KSG2042、KSG2043、KSG2044、KSG2045、KSG2060、KSG2061、KSG2062、KSG2063、KSG2064），及高分辨超快速彩色凝胶配制试剂盒系列（KSG2066、KSG2067、KSG2068、KSG2071、KSG2072、KSG2073），可满足不同实验需求。